选取的雪莲注射液每毫升含雪莲*酮5mg,具有消炎镇痛、消肿、活血化瘀等功效,主要用于治疗风湿性及类风湿性关节炎。现报道该制剂药理作用及其机制初步研究。
1动物与材料NIH小鼠和SD大鼠(新疆流行病研究所)。雪莲注射液;角叉菜胶;RPMI一培养基(美国JRSeientifieInc);刀豆蛋白A(CONA)、脂多糖(LPS)均为美国Sigma公司产品;阿司匹林片、安乃近注射液;阿司匹林精氨酸盐(进口产品,配成10mg/ml溶液备用;[H]TDR。
2方法与结果2.1对角叉菜胶诱发大鼠足爪肿胀的影响
选取健康大鼠40只,体重士35g,均为5月龄,雌雄兼用,依体重匀衡分为生理盐水对照组(NS),阿司匹林(mg/kg)对照组和10,20,30ml/kg的3个剂量雪莲注射液组。各组大鼠给药前均以足爪测定仪测定右后足爪的容积(mmHg柱)。然后连续用药3d,于末次给药后用角又菜胶致炎后测大鼠足爪的肿胀度。结果雪莲注射液组均明显抑制大鼠足爪的肿胀度,抑制率23%~61%。作用持续6h以上,强度与阿司匹林类似。
2.2对巨噬细胞产生白介素1的影响IL一1的制备取NIH小鼠12只,ipRPMI-液2ml,轻揉腹部,抽取腹腔液1.5ml,离心15min(r/min),弃去上清液,以RPMI一液洗2次,调整巨噬细胞浓度为2×10^6ml,分于24孔培养板中,置37摄氏度,5%二氧化碳孵箱培养2h,吸弃去液中非粘附细胞,获得均匀的巨噬细胞单层。每孔0.9ml的10%小牛血清RPMI一液内含LPS8μg/ml,3个浓度(3,6,12μl)的雪莲注射液,阿司匹林精氨酸盐溶液(5mg/ml)和NS(μl),每组10孔。37℃,5%二氧化碳培养箱培养48h,收集各组培养液,离心10min(r/min)过滤,-20℃保存,即为IL一1的粗制品。IL一1的活性检测取上述NIH小鼠10只,无菌条件下取出胸腺,剪碎,过筛,用5%小牛血清液冲洗3次,并用10%小牛血清RPMI-液调整胸腺细胞浓度为3×10^6/ml,按每孔ml置入96孔培养板中,加CONA3mg/ml、3种IL一l液各ml,每组10孔。37℃,5%二氧化碳孵箱中培养48h,每孔加[H]TDR20μl,以LKB一液体闪烁计数仪测定放射强度(dpm)。作组间均数t检验。结果,大、中剂量的雪莲注射液抑制巨噬细胞产生IL一1。
2.3镇痛作用
健康雌小鼠50只,疼痛潜伏期在30s之内。依体重均衡分为阴性对照组(NS)、安乃近注射液(5ml/kg)阳性对照组和3个不同剂量(10,20,30ml/kg)的雪莲注射液组。ip,qd连用3d。于末次给药后lh,用热板法测量并记录小鼠疼痛潜伏期。结果,雪莲注射液均使潜伏期明显延长,以中、大剂量为强,作用持续4h以上,但均不如安乃近。
3讨论角叉菜胶所致局部炎性水肿与局部前列腺素合成增加有关,并有血管活性物质与缓激肤类参与,与人类风湿性关节致病介质类似。雪莲注射液可能是通过抑制前列腺素合成或释放,以及抑制血管通透性而发挥作用。巨噬细胞产生的IL一1是风湿痛的另一重要致病介质,雪莲注射液抑制巨噬细胞产生IL一1是其抗风湿病的另一重要原理。
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