具中科博生研究表明，尽管移植物体外净化在AHSCT中的价值尚有争议，但普遍认为，除白血病外，淋巴瘤、神经母细胞瘤、乳腺癌等移植后复发也与移植物中MRD有关。
从理论上讲，移植物体外净化利用造血细胞与肿瘤细胞生物学上的差异最大限度杀伤肿瘤细胞并保存造血干/祖细胞，对肿瘤的治疗具有重要意义。移植物体外净化的方法主要分为两类：正净化(positiveselection)是将正常造血干细胞从移植物中分离纯化；负净化(negativeselection)是指将肿瘤细胞从移植物中清除。中科博生。
（1）正净化
根据造血干/祖细胞在物理性状和免疫标志等方面的特性建立了一些常用分选方法。
1）FACS分选法。根据HSC的光散射性质或荧光标记抗体结合分离细胞。该方法分选的HSC纯度高，但费时耗资，目前只限于科研中CD34+细胞亚群的分选；中科博生。
2）抗CD34单抗介导的免疫吸附。该类方法分离速度快，纯度高，分离细胞量大，并且耗资小，操作简便。其中免疫磁珠法和生物素一抗生物素免疫亲和层析法已有成品仪器出售并进入临床应用。后者可以处理相对大量的样本，但不足之处是纯度较前者差，且细胞丢失量较多；中科博生。
3）单克隆抗体铺展贴壁(如CELLector)o该方法较为繁琐，多用于实验研究；中科博生。
4）HSC体外扩增。利用适合HSC扩增而不利于肿瘤细胞生长的扩增体系进行体外培养，具有正负净化的双重作用；中科博生。
5）利用细胞物理学特性的分离方法。如密度梯度离心、淘洗离心等。该类方法HSC含量低，净化效果不理想。中科博生。
（2）负净化
文献报道的体外负净化方法很多，此处主要介绍一些已用于临床，并取得一定疗效的方法。
1)物理学方法。利用细胞大小、形状、密度、表面电荷、对温度和微波的敏感性等方面的差异将肿瘤细胞除去。深低温C~°C)冻存、高温(42-43*0或特定波长的光照射血咋嘛(HP)、步花清(MC-)和氧化补骨脂素等光敏剂对大多数耐药的肿瘤细胞有杀伤作用。中科博生。
2)药物。目前用于体外净化的药物多为实验性质，用于临床者较少，多为环磷酰胺衍生物。理想的体外净化药物应满足以下要求：
①对造血干细胞的毒性小；
②白血病细胞和正常细胞对其敏感性有较大差异；
③细胞周期非特异性药物；
④净化后易清除；
⑤回输体内的细胞安全无毒，无致癌性。中科博生。
临床常用的药物有：4-氢过氧环磷酰胺(4-HC)、VP-16、阿糖鸟膜吟(Ara-G)等。
3)免疫方法。抗肿瘤细胞的单克隆抗体(简称单抗)已被用于小细胞肺癌、乳腺癌、神经母细胞瘤、白血病等肿瘤的自体骨髓体外净化。单抗本身不具备直接细胞毒性，需要依赖补体或免疫毒素等方法发挥对肿瘤细胞的导向性细胞毒作用。如针对肿瘤细胞表面抗原特异性采用多种单抗制备的免疫毒素联合应用，可清除4个对數级以上的肿瘤细胞，同时保昭70%以上的CFU-GEMM。中科博生。
4）生物学方法.体外长期液体培养及基于恢技术联合加用免疫效应细胞如iFNa等细胞因*及淋巴因子1L-2激活的淋巴细胞（LAK）、NK细胞（ANK）及骨髓细胞（ABM）表现出对肿瘤细胞强有力的杀伤作用，但上述方法用于临床尚需进一步研究它们对造血细胞的影响。中科博生。
5）分子生物学方法。利用反义核酸技术设计的针对肿瘤特异基因或某些原临基因的反义核酸或核酶，及将带有自杀基因、抑癌基因的不能转染造血干细胞的逆转录病毒转染肿瘤细胞，表现出细胞特异性杀伤，而对正常细胞无毒性。中科博生。
（3）免疫双净化
Nimgaonker等报道用CD34*正净化联合McAb-C负净化对急性髓性白血病（AML）患者移植物进行双净化，使白血病细胞减少7个对数级，CD15+细胞减少14个对数级，而造血细胞无明显损失。中科博生。
最近的临床研究表明，用免疫磁珠CD34+正净化联合抗B细胞抗体的免疫磁珠负净化明显优于单一的免疫正净化或负净化，而外周血造血干/祖细胞重建造血功能并未降低。Paulus等将此法用于被肿瘤严重污染的慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者骨髓，清除了超过6个对数级的CLL细胞，他们认为此法不仅可达到更为彻底的净化，而且可清除CD34+细胞纯化后可能存在于移植物中的肿瘤干细胞（CD34+CD19+）。中科博生。
从长远看，双净化措施可保留高纯度的造血干细胞，最大限度地清除肿瘤细胞，在自体造血干细胞移植中有着广阔的应用前景。
中科博生期待大家一起探讨学习。