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PlantCellPhysiol [复制链接]

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年在PlantCellPhysiol上发表了山东农业大学作物生物学国家重点实验室郭兴启团队的研究论文“TheCottonWRKYTranscriptionFactorGhWRKY17FunctionsinDroughtandSaltStressinTransgenicNicotianabenthamianaThroughABASignalingandtheModulationofReactiveOxygenSpeciesProduction”。该文章研究了棉花转录因子GhWRKY17通过ABA信号转导和调节活性氧产生在烟草干旱和盐胁迫中的作用。

WRKY转录因子在植物对非生物胁迫起重要作用。与棉花耐旱性和耐盐性相关的WRKY基因还不清楚。在此,分离并鉴定了GhWRKY17,在干旱、盐、H2O2和ABA胁迫下被诱导。并且GhWRKY17在烟草中的组成性表达显著降低了植物对干旱和盐胁迫的耐受性。GhWRKY17转基因植株对ABA介导的种子萌发和根生长更为敏感。然而,过表达GhWRKY17能抑制ABA诱导的气孔关闭。在干旱和盐胁迫条件下,ABA诱导基因的转录水平明显受到抑制。GhWRKY17基因植株体内ROS积累,电解质渗漏和丙二醛升高。结果表明,GhWRKY17通过ABA信号和调节细胞内ROS的产生来响应干旱和盐胁迫。

方法与结果:

1.从棉花基因组中克隆出一个基因,分析序列鉴定为GhWRKY17,瞬时表达的GhWRKY17-GFP融合蛋白定位于细胞核。

2.酵母单杂验证GhWRKY17是否能与W-box或mW-box元件结合,结果显示表明GhWRKY17可与W-box元件结合激活酵母系统中的转录。GUS实验也证明WRKY17与W-box的相互作用。所以GhWRKY17具有转录激活活性,与W-box结合。

3.为了研究GhWRKY17作用,qPCR发现GhWRKY17在干旱、盐、H2O2和ABA处理下有不同程度的上调。并且受ABA处理下上调最明显,结果表明GhWRKY17可能在渗透胁迫中起作用,并且可能依赖于脱落酸。

4.为了研究GhWRKY17在ABA介导的反应中的生物学功能,研究了WRKY17过表达转基因烟草的种子在ABA处理下的萌发和萌发后生长,结果表明GhWRKY17在种子萌发和萌发后的生长过程中是ABA信号的负调控因子。

5.在甘露醇和NaCl处理下,GhWRKY17转基因植株在胁迫条件下的根系生长受到的抑制比WT植株严重。用ABA合成抑制剂钨酸钠处理后,OE系的干旱和盐敏感表型消失,表明,GhWRKY17植株对干旱和盐敏感与ABA有关。

6.GhWRKY17的过表达降低了烟草营养生长期的抗旱性和耐盐性,并且表现出更高的ROS水平和更强的氧化损伤,氧化相关基因的表达激活且降低了抗氧化酶活性。

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