蓝圆转阴TM壹型+蓝圆转阴TM贰型
对降低猪场蓝耳和圆环阳性率的试验研究
胡世君张洪培彭代国周作勇曹立停
实验目的：人类社会对食品卫生安全、生物安全的要求越来越高，养殖业对抗生素、抗病毒药物的广泛使用，对人类健康的威胁日益加重。为充分挖掘中医药宝库，搭建绿色养殖平台，探索中药健康养殖之路，我们选择了中药制品蓝圆转阴TM壹型（清热散加减）和蓝圆转阴TM贰型（*连解毒散加减）进行本次饲喂试验，重在探索复方中药制品对蓝耳病毒及圆环病毒的影响，以减少、控制甚至放弃养殖业对抗生素和抗病毒药物的依赖性使用。
一、材料及方法
1.材料
1.1蓝圆转阴TM壹型（批号：）、蓝圆转阴TM贰型（批号：），来源于重庆西农大科信动物药业有限公司。
1.2试验动物来源：四川宜宾合众养殖有限公司、重庆市种猪场、重庆市三层岩畜禽养殖场，具有这两种疑似疾病的三个规模化猪场。
2.方法
2.1试验动物来源及分組
在四川、重庆选择具有流产，死胎等繁殖障碍，断奶前后仔猪生长发育不良，消瘦，贫血，僵猪较多，死陶率高，保育猪易发病，发病后耳变蓝，间质性肺炎等具有明显的蓝耳病和圆环病毒病的猪场三个，分别命名为A、B、C。
A猪场随机选择经产母猪60-70头、B、C猪场1月龄左右断奶仔猪60-70头，随机分成二组，一组为试验组，一组为对照组，试验组在饲料中添加蓝圆转阴TM壹型1kg/吨+蓝圆转阴TM贰型1kg/吨，连用60天，对照组不添加。
2.2血清样品采集
三个猪场的试验组和对照组猪只，在0天、4周、8周前腔静脉采血，分离血清，-20℃冰箱保存送检。
2.3将被检血清分别进行蓝耳病毒病、圆环病毒病RT-PCR检测
2.4蓝耳病毒病、圆环病毒病RT-PCR检测方法，按蓝耳病毒病、圆环病毒病RT-PCR检测试剂盒说明书进行。
二、试验结果
2.1.A猪场蓝耳病毒病、圆环病毒病RT-PCR检测结果，详见表1
图1A猪场蓝圆转阴TM壹型+蓝圆转阴TM贰型试验结果柱形图
2.2B猪场蓝耳病毒病、圆环病毒病RT-PCR检测结果，详见表2
图2B猪场蓝圆转阴TM壹型+蓝圆转阴TM贰型试验结果柱形图
2.3C猪场蓝耳病毒病、圆环病毒病RT-PCR检测结果，详见表3
图3C猪场蓝圆转阴TM壹型+蓝圆转阴TM贰型试验结果柱形图
三、A猪场试验结果、结论与建议
3.1A猪场试验结果：A猪场使用蓝圆转阴TM壹型+蓝圆转阴TM贰型饲喂4周后，蓝耳病（PRRS）阳性率由36.36%下降至6.06%，圆环病毒阳性率由45.45%降为9.09%，蓝耳病毒和圆环病毒混合感染的阳性率由27.28%降至3.03%；使用8周后，蓝耳、圆环及蓝耳圆环混合感染阳性率分别降为3.03%、3.03%和3.03%，下降非常明显，具有明显的清除病毒效果，清除率达到90%以上；而对照組0周、4周、8周后，蓝耳病阳性率分别为41.18%、32.25%、30.00%，圆环病毒阳性率分别为47.06%、41.98%、33.33%，蓝耳和圆环混合感染阳性率分别为29.41%、25.80%、23.33%，4周和8周因混合感染共死亡4头。
3.2结论：蓝圆转阴TM壹型1kg/吨饲料+蓝圆转阴TM贰型1kg/吨饲料，不间断饲喂4周或8周，能有效清除母猪场蓝耳和圆环病毒，降低阳性率，与对照组相比，具有极显著差异，能有效控制母猪场蓝耳、圆环及其混合感染的发生。
3.3建议：蓝圆转阴TM壹型1kg/吨饲料+蓝圆转阴TM贰型1kg/吨饲料，母猪场每半年至少连用8周。蓝圆转阴TM壹型+蓝圆转阴TM贰型，纯中药制品，对怀孕期胚胎发育和泌乳期产乳，没有任何不良影响；对疫苗接种，具有协同增效作用，能有效降低母猪场发病率，降低繁殖障碍疾病发生（参阅《蓝圆转阴壹型+蓝圆转阴贰型对降低繁殖障碍疾病和提高仔猪初生重的试验研究》、《蓝圆转阴壹型+蓝圆转阴贰型对提高猪瘟、蓝耳、园环、伪狂犬免疫效果的试验研究》）。
四、B、C猪场试验结果、结论与建议
4.1B猪场试验结果：B猪场使用蓝圆转阴TM壹型+蓝圆转阴TM贰型饲喂4周后，蓝耳病（PRRS）阳性率由27.78%下降至5.56%，圆环病毒阳性率由36.11%降为8.33%，蓝耳和圆环混合感染阳性率由22.22%降至5.56%；使用8周后，蓝耳、圆环及蓝耳圆环混合感染阳性率分别降为2.78%、2.78%和2.78%，下降非常明显，具有明显的清除病毒效果，清除率达到90%以上；而对照組0周、4周、8周后，蓝耳病阳性率分别为26.47%、26.66%、31.03%，圆环病毒阳性率分别为35.29%、36.66%、37.93%，蓝耳和圆环混合感染阳性率分别为20.59%、23.33%、24.14%，4周和8周因混合感染共死亡5头。
4.2C猪场试验结果：C猪场使用蓝圆转阴TM壹型+蓝圆转阴TM贰型饲喂4周后，蓝耳病（PRRS）阳性率由22.85%下降至5.71%，圆环病毒阳性率由31.43%降为8.57%，蓝耳和圆环混合感染的阳性率由17.14%降至5.71%；使用8周后，蓝耳、圆环及蓝耳圆环混合感染阳性率分别为2.86%、2.86%和2.86%，下降非常明显，具有明显的清除病毒效果，清除率达到90%以上；而对照組0周、4周、8周后，蓝耳病毒阳性率分别为21.21%、19.35%、17.24%，圆环病毒阳性率分别为30.30%、29.03%、27.59%，蓝耳和圆环混合感染阳性率分别为18.18%、16.13%、13.79%，4周和8周因混合感染共死亡4头。
4.3结论：蓝圆转阴TM壹型1kg/吨饲料+蓝圆转阴TM贰型1kg/吨饲料，不间断饲喂4周或8周，能有效清除猪场蓝耳和圆环病毒，降低阳性率，与对照组相比，具有极显著差异，能有效控制猪场蓝耳、圆环及其混合感染的发生。
4.4建议：蓝圆转阴TM壹型1kg/吨饲料+蓝圆转阴TM贰型1kg/吨饲料，教槽期开始使用，连用8周，停4周，再用4周，以此类推。蓝圆转阴TM壹型+蓝圆转阴TM贰型，纯中药制品，对疫苗接种，具有协同增效作用，能有效降低猪场发病率；对降低腹泻率、提高饲料利用率和促进生长速度有明显作用（参阅《蓝圆转阴壹型+蓝圆转阴贰型对提高生长育肥猪生产性能的试验研究》、《蓝圆转阴壹型+蓝圆转阴贰型对降低保育猪发病率的试验研究》、《蓝圆转阴壹型+蓝圆转阴贰型对降低繁殖障碍疾病和提高仔猪初生重的试验研究》、《蓝圆转阴壹型+蓝圆转阴贰型对提高猪瘟、蓝耳、园环、伪狂犬免疫效果的试验研究》）。
五、讨论
5.1蓝圆转阴TM壹型，主要由板蓝根、淫羊藿、*芪、大青叶、双花、连翘、*参、茯苓、大*、八角、茴香等+抗应激保肝护肾强壮剂BTL+免疫增强剂+复合多种维生素+乳酸屎肠球菌+多种芽孢杆菌等组成；蓝圆转阴TM贰型，主要由*连、*芩、*柏、栀子、生地+调味剂等组成。采用纳米技术+特殊发酵工艺，即先将中药部分粉碎为目过筛，达到60%以上细胞壁破碎，再与其它物质混合发酵而成。蓝圆转阴TM壹型+蓝圆转阴TM贰型，临床上有两大重要功能：一是直接杀灭和清除体內的病毒作用；二是有效增加巨噬细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞数量，增强免疫细胞吞噬功能，激活动物机体各系统的免疫活性和全面调节机体代谢。
5.2直接抗病毒作用：据报导，中药具有直接抗病毒作用，在病毒侵入细胞前进行杀灭，如大*醇提取液中的蒽醌类、板蓝根等均对病毒有直接杀灭作用[1]；八角、茴香对A型流感病毒有直接杀灭作用；中药中的*酮类，多糖及其衍生物，三萜类化合物及其衍生物（如甘草甜素衍生物）、生物碱及苷类等，都能阻止病毒颗粒对宿主细胞的吸附过程而发挥抗病毒作用；中药中的多酚类物质，可抑制病毒蛋白质和RNA的合成，同时可抑制病毒从感染细胞向未感染细胞扩散，阻止合胞体形成，从而阻止病毒由感染细胞向未感染细胞的侵染[2]。
5.3间接抗病毒作用：中药的间接抗病毒作用，主要是促进免疫器官如胸腺、腔上囊、脾脏、外周淋巴组织的发育，增强机体的免疫力。如*芪多糖和香菇多糖均能促进脾脏、胸腺等免疫器官的发育，*连、*芩、*柏等中的小檗碱，能激活机体网状内皮系统功能，增强机体对病原微生物的吞噬能力。
5.4增强体液免疫功能：据报道，*参、*芪、白朮、淫羊藿、枸杞子等均能增强机体的体液免疫，使血清中IgG、IgA、IgM水平提高，抗体是抗病毒体液免疫的主要因素，分泌型IgA可防止病毒的局部入侵，IgG、IgM可中断已入侵的病毒通过血液循环扩散。蓝圆转阴TM壹型+蓝圆转阴TM贰型，对接种疫苗，具有协同增效作用，提高抗体水平并延长有效抗体在体内的维持时间。
5.5增强细胞免疫功能：细胞免疫是T细胞介导的机体重要的免疫反应，可以抵抗细胞内微生物如病毒和宿主细胞内增生的细菌感染。因为抗体不能进入受感染的细胞，细胞内病毒的消灭主要依靠细胞免疫。有人报道，淫羊藿多糖可促进小鼠胸腺成熟细胞的释放，并直接增强T细胞的增殖和分化，诱导产生干扰素（IFN），主要作用于正常细胞，使之产生抗病毒蛋白和抑制病毒高分子生物合成，使机体细胞获得抗病毒能力；在入侵部位的细胞产生的干扰素可渗透到临近细胞而限制病毒向四周扩散。现代研究证实，中药中有许多具有内源性IFN诱生作用或促诱生作用的药物，如从香菇中提取的香菇素在小鼠中能诱导血清IFN，有人从甘草中提取的甘草甜素及甘草次酸制剂能诱生Ⅱ型IFN，对细胞免疫功能有增强作用，增强自然杀伤细胞（NKC）的活性。自然杀伤细胞是机体参与免疫反应的淋巴细胞，能在体内杀伤肿瘤细胞和病毒感染的细胞，起到免疫监视和抗感染作用。据报道，生地、熟地、山药、补骨脂、仙灵脾等中药均能使老龄机体NKC活性明显升高[3][4][5]。
参考文献
1.叶建平等.上海免疫学杂志[J].上海:,10(4):～
2.褚秀玲,苏建青,韦旭斌.中兽医药杂志[J].,1:26～27
3.李铁民,梁再赋.甘草提取物及其衍生物的抗病毒研究进展[J].中草药,,25(12):-
4.王长云,管华诗.多糖抗病毒作用研究进展[J].生物工程进展,,20(2):3-7
5.张永兴,陈忻,许利平,等.神奇的抗病毒中草药[M].北京:中国中医药出版社,.6-8.
6.彭代国等，科特免对猪瘟疫苗免疫效果的影响.西南大学学报[J].（12）
7.彭代国等，毒立克对动物免疫功能的影响，黑龙江畜牧兽医[J].（10）
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